猪病怎么采集样本?怎么送检?

  
  • xiaoz   袁万哲  
  • 2020-01-23 15:27:24
    【导读】要做好猪病检测,就需要相应的样本。样本应该说比较多,包括相应发病猪的病料,如血清、流产的胎儿、脐带血、唾液等。   对于样本,怎么采集?怎么送检?首先,所送检的样本应该是新鲜的、干净的、典型的。尤其在临床中,如果要送检发...
    要做好猪病检测,就需要相应的样本。样本应该说比较多,包括相应发病猪的病料,如血清、流产的胎儿、脐带血、唾液等。

     

    对于样本,怎么采集?怎么送检?首先,所送检的样本应该是新鲜的、干净的、典型的。尤其在临床中,如果要送检发病猪的病料,应该选取临床发病比较典型的病例,最好能够代表整个动物发病的特点。选1~2头剖解,采集病变比较典型的组织,以淋巴结、脾脏、肺脏、肾脏、血清、扁桃体为主,同时也可以采集流产胎儿以及脐带血。如果要进行抗体监测,我建议全群采样,以进一步了解抗体在不同猪群中的消长情况。

     

    这其中有这样的建议(见表1):对于公猪,全群的每一头都采,可以检测猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳、圆环、细小、乙脑的抗体;对于后备母猪,在混群之前,可以采样,检测猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳、圆环;对于妊娠母猪,在分娩前四周,可以进行猪瘟、伪狂犬、圆环、口蹄疫、细小、乙脑、流行性腹泻的检测;对于哺乳母猪,分娩后两周,可以进行猪瘟、伪狂犬、圆环、口蹄疫、细小、乙脑的检测;对于断奶仔猪,可以选择25~30日龄,进行猪瘟、伪狂犬、蓝耳、圆环的检测;对于保育猪,可以选择55~60日龄进行猪瘟、伪狂犬、蓝耳、圆环和口蹄疫的检测;对于育肥猪,可以选择90~120斤,或者150厘米的猪,也是检测猪瘟、伪狂犬、蓝耳、圆环、口蹄疫等项目。对于后备母猪、妊娠哺乳母猪、断奶仔猪、保育猪、育肥猪,一般采样数≥10个,一年检测3~4次。

     

    表1  不同生产阶段猪的采样及检测

    生产阶段

    采血时间

    采血数

    频次

    检测项目

    公猪

     

    全采

     

     

     

     

    一年

    3-4次

    猜瘟、伪狂犬(gB、gE)、蓝耳、圆环、细小、乙脑

    后备母猪

    混群前

    ≥10

    猜瘟、伪狂犬(gB、gE)、蓝耳、圆环

    妊娠母猪

    分娩前4周

    ≥10

    猪瘟、伪狂犬(gB、gE)、蓝耳、圆环、口蹄疫、细小、乙脑、流行性腹泻

    哺乳母猪

    分娩后2周

    ≥10

    猪瘟、伪狂犬(gB. gE)、蓝耳、

    圆环、口蹄疫、细小、乙脑

    断奶仔猪

    25-30日龄

    ≥10

    猪瘟、伪狂大(gB、gE)、蓝耳、圆环

    保育猪

    55-60日龄

    ≥10

    猪瘟、伪狂大(gB、gE)、蓝耳、圆环、口蹄疫

    育肥猪1

    90-120日龄

    ≥10

    猪瘟、伪狂大(gB、gE)、蓝耳、

    圆环、口蹄疫

    育肥猪2

    150日龄

    ≥10

    猪瘟、伪狂大(gB、gE)、蓝耳、

    圆环、口蹄疫

     

    具体到要采多少头份,可以根据存栏母猪来计算(见表2):一般存栏母猪100头,母猪采10头,其他仔猪、保育猪、育肥猪,可以采12头;存栏500头的,母猪是采12头,仔猪、保育猪、育肥猪各35头;存栏1000头的,母猪是采15头,仔猪、保育猪、育肥猪可以采18头;存栏3000多的,母猪是采20头,其他的可以采25头;对于100头以下的,可以参考100头来采样;3000头以上的,可以参考3000头的采样。

     

    表2  采样头数计算方式

    存栏母猪

    (头)

     

    母猪

    仔猪

    保育猪

    育肥猪

    100

    10

    12

    12

    12

    500

    12

    15

    15

    15

    1000

    15

    18

    18

    18

    3000

    20

    25

    25

    25

    备注:100头以下可以参考100头采样;3000头以上可以参考3000头采样。

     

    对于血液,目前主要检测的是抗体。血液采集,一般需要采3~5毫升,采完之后,把相应的注射器平放静置15~20分钟,等血液凝固之后送检,有条件的单位可以分离血清,放到4~8度保存,之后送检。送检就涉及到运输,建议冷藏运输。当然在运输之前,需要包装,最好是用泡沫箱,泡沫箱中需要放冰袋。根据运输时气温情况以及运输的时间长短,加入足够的冰袋,防止在运输过程中样本出现腐败。同时,要登记样品及猪场的信息,包括猪厂的厂名、样品的数量、送检人、免疫程序、最近免疫情况、临床的表现、用药情况等。把登记的纸张和病料,一块送到实验室。

     

    当然,对重点采样部位,应该每次都要采集,包括肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、肺脏、扁桃体,同时根据不同的目的采取侧重点不同的各类样本。这里涉及的内容比较多,我给大家简单总结一下(见表3):对腹泻类的病原,建议,一定要采粪便及相应的肠道(包括肠系膜淋巴结);对于呼吸系统的疾病,可以采肺脏,淋巴结;对于繁殖障碍的疾病,可以采流产的胎儿,包括其他的组织。

     

    表3  不同疾病的采样部位

    病名

    建议采集的病料

    猪瘟

    扁桃体、脾脏、肾脏、淋巴结、血样

    伪狂犬病

    神经组织、扁桃体、血样

    猪繁殖与呼吸综合征

    肺脏、血样、流产胎儿、淋巴结

    圆环病毒感染

    肺脏、淋巴结、脾、肾脏、血样

    猪细小病毒病

    死胎、母猪血样、扁桃体

    传染性胃肠炎/轮状病毒/流行性腹泻

    空肠、肠系膜淋巴结、粪便

    Kobuvirus/Bocavirus腹泻病毒

    空肠、粪便

    猪增生性肠炎

    回肠、粪便

    副猪嗜血杆菌病

    肺脏(带气管)、心包液、关节、脑

    链球菌病

    肺脏(带气管)、脑、淋巴结、关节

    传染性萎缩性鼻炎

    肺脏(带气管)、深部鼻液

    猪肺疫

    肺脏(带气管)、淋巴结

    猪传染性胸膜肺炎

    肺脏(带气管)

    猪沙门氏菌病

    肺脏(带气管)、肝脏、肠内容物

    大肠杆菌病

    小肠及内容物、肺脏、心脏

    附红细胞体病

    新鲜血液

    弓形体病

    抗凝血液、肺脏

     

    通过血液方面可以检测它的抗体,另外,如果猪有病毒血症,还可以检测病原。目前可以通过两类技术采血:

     

    一是可以通过猪的耳静脉来采,猪的耳静脉应该说还是比较明显,一般就在耳缘周围地方进针,一般逆着血流方向都可以采血。但是这种方法有缺陷,就是采血量不是很大,采血过程中可能会跑针。所以我想给大家建议比较好的采血方式,就是可以通过猪的前腔静脉来采血。静脉是在猪的脖颈下面,血管比较粗,在采血过程中出血比较快,出血量也比较大。具体操作过程:如果说是母猪,在限位栏中,可能会更好采集,先用保定绳来保定,之后有人在脖颈下面就能操作;如果是育肥猪,需要2~3个人来配合1个人保定,用保定绳穿过猪的上颌,把它的头提起来,然后保定人可以骑在猪的身上,或者是在侧方保定,让猪的屁股来顶着墙,另外一个人就可以抽血,或者说同时有几个人保定前腿和后腿,然后通过前腔静脉来采取。在临床中,我也建议大家用这样的方式来采血。

     

    另外,请注意:对于母猪的抗体或病原的检测,有时候可以通过收集脐带血来进行,这在临床中要比通过耳静脉或者是前腔静脉采血更容易些。

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