开幕式
主持人:中国畜牧兽医学会养猪学分会秘书长 王楚端教授
中国畜牧兽医学会养猪学分会理事长 王立贤研究员致词
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 梅书棋副所长致词
报告主持人:李千军研究员,天津市生猪产业技术体系创新团队首席专家,天津市畜牧兽医研究所研究员,养猪研究室主任
报告主题:《非洲猪瘟疫苗研究现状及展望》
报告人:乔松林 研究员 河南省农业科学院
报告内容:
一、最经典的疫苗研制思路-灭活疫苗没有效果
猪巨噬细胞增殖的ASFV
ASFV感染的巨噬细胞提取物
ASFV感染猪脾组织匀浆
纯化的培养ASFV
二、传统减毒活疫苗
传统减毒活疫苗临床试验带来灾难性后果:
免疫后的许多猪出现了肺炎、关节炎、皮肤溃疡、流产和死亡等疫苗免疫副作用。
特别是葡萄牙,550,000只猪免疫后有128,684只出现免疫副作用,且出现大量病毒携带猪。
疫苗毒力返强。随后出现的ASF疫情中分离的毒株来自疫苗接种。
ASF弱毒疫苗接种猪免疫力降低,发生继发感染。
由于此次失败的临床经验,ASF再无弱毒疫苗进行过田间试验!
三、基因缺失活疫苗
非洲猪瘟病毒的病毒结构极其复杂
但复杂也提供了机会
170个ORFs,编码200多种蛋白
三分之二的蛋白不是病毒复制所必须
鉴定并缺失毒力基因
有些编码蛋白能够抑制宿主免疫反应
ASFV基因缺失疫苗展望
有利因素
--ASFV疫苗研究重点,近五年取得了一定进展。
--中国科研机构加入ASF基因缺失疫苗研究,将大大加快研究进程。
--CRISPR/Cas9(基因编辑技术)提高了效率,缩短疫苗开发时间。
存在问题
--疫苗的安全性是制约商业化应用的最重要因素。
——我们还需要很长的路要走!
四、非洲猪瘟新型疫苗研究
优势
--安全性好,不存在散毒、毒力返强的危险
--容易鉴别诊断,有利于疫病净化
挑战
--复杂的基因组结构、病毒结构
--尚不清楚的感染和致病机制
五、非洲猪瘟新型疫苗研究展望
需要更多基础研究的基础研究
--解析感染机制
鉴定病毒受体、参与吸附、胞内转运、膜融合的病毒蛋白和宿主因子
--免疫机制
体液免疫、细胞免疫识别
--致病机制
前途是光明的、道路是曲折的
--我们一定会更加努力的工作
报告主题:《非洲猪瘟下猪血液制品的安全,选择和使用-欧盟的经验》
报告人:Javier Polo博士(PhD) 欧洲动物蛋白协会(EAPA)技术顾问,美国APC公司全球研发副总裁
翻译:申雁滨博士
报告内容:
一、喷雾干燥猪血浆是否有传播疾病的风险性?
1、喷雾干燥血浆色生产工艺
从官方兽医监督的屠宰场获取全血-加入抗凝剂并低温保存-通过APC公司专用的罐车运输到专用的生产工厂-离心分离出血浆和红细胞-喷雾干燥保持产品的功能性-成品包装在新包装袋或吨包-质检检测合格后方可销售
2、喷雾干燥血浆生产过程中保证生物安全的措施
WHO发布的旨在确保人类输血用血液产品的安全、无病毒感染风险的有关病毒灭活和去除程序的指南。
确保血浆制品安全、无病毒的措施:
血液制品安全、无病毒感染风险是通过生产过程中的三种互补措施来保证的:
(1)、血源的选择
屠宰动物已经通过官方兽医宰前检查,符合人类食用的标准;并在官方批准的屠宰场屠宰及收集血液。
这样可以避免:有临床症状的生病的动物、来自有OIE列表疾病爆发地区的动物
(2)、血源和血浆库的检测
产品来自于无非洲猪瘟病毒国家的证书(产地北美和西班牙)
阴性证书:
阳性不代表有感染力
牛血浆不包含任何猪源成分的证书,或猪血浆不包含任何牛源成分的证书
还可以检测其他客户关心的病原物
(3)、生产过程中的病毒灭活和去除程序
血浆蛋白的加工工艺中有多个独立有效的步骤可以灭活4个数量级的病毒
a抗体中和(对特定病毒)
b喷雾干燥过程使产品通体加热到至少80°C
进口温度220 °C ,出口温度80-85 °C
操作员确保在干燥器上保持进出口空气温度(从喷嘴喷出到底部热交换完成约30-90秒)
持续监控温度是一种标准程序
c成品加热并保存在20°C下14天
喷雾干燥的牛血浆粉接种PEDV后室温储藏7天后就不再具有感染性
波兰研究ASF的试验文章结果:
人工接种的活非洲猪瘟病毒在22度室温干燥的条件下7天后失去感染活力
派斯通的试验表明:
人工接种的非洲猪瘟病毒在全价饲料上的半衰期为4.3天(实验平均气温12.6度)
SHIC基于半衰期数据建议饲料20度存放14-20天
3、生物安全性的饲养试验
2013年巴西的养猪业使用PEDV PCR阳性的猪血浆蛋白饲喂了250万到300万头猪。
尽管PEDV PCR阳性的猪血浆蛋白在巴西广泛应用,巴西的猪群没有感染PEDV.
2013年加拿大西部的养猪业使用PEDV PCR阳性的猪血浆蛋白饲喂了350万到400万头猪。
这个期间西加拿大无PEDv
总结:
世卫组织的规则:供体选择、检测血浆库、病毒灭活和去除程序
APC关于喷雾干燥血浆粉的生产规范:政府批准并监督的屠宰场、检测血浆成品、抗体中和、喷雾干燥过程使产品通体加热到至少80度、成品加热并保存在20度14天
4、导致疾病传播的风险因素
目前养猪业的生物安全标准无法有效阻止病毒的侵入
行业的结构性变化:贸易全球化、行业的垂直整合、活猪的大量运输
欧洲非洲猪瘟经验
1、饲料没有被认为是传播途径,风险很低
2、农场生物安全是最有效的防控非洲猪瘟的方式
中国非洲猪瘟流行病学研究
生猪及其产品跨区域调运,占全部疫情约19%。
因餐厨剩余物喂猪引发的疫情共有23起,占全部疫情约34%。
生猪调运车辆和贩运人员携带病毒后,不经彻底消毒进入其他猪场,占全部疫情约46%
饲料没有导致非洲猪瘟的传播
中国非洲猪瘟大部分以先感染母猪和育肥猪为主,理论上饲喂了血浆的小猪感染率低。
疾病传播的风险性因素:
活猪的移动:进出猪场、距离其他猪场的距离
人员的移动:农场共享设备和人员
运输饲料的车辆:已被病毒污染的饲料、泔水
环境:风向、水流
5、世界动物卫生组织对喷雾干燥猪血浆的定位
污污染是病毒通过车辆,人员,设备,包括饲料非接触性的传播的主要途径
遵循良好的生产规范,此类产品不是可能的传染源。
在现行非洲猪瘟的威胁下欧盟对于喷雾干燥猪血浆的定位
动物血产品在2005年被欧盟批准可以在非反刍动物上应用
欧盟,每年有超过5000万头猪使用喷雾干燥猪血浆
世界范围来看,有超过3亿头猪使用APC生产的血浆
过去的35年中,有超过30亿头猪使用喷雾干燥血浆
二、如果我们放弃使用喷雾干燥的猪血浆的话,我们会损失什么
1、血浆是很重要的饲料原料
小猪料中添加血浆会:增加日增重、提高采食量、减少断奶应激、提升生产效率
血浆不能被其他高品质蛋白所替代
2008年美国动物营养学会评选喷雾干燥血浆蛋白为过去100年间猪营养学最重要的10大发现之一。
2、猪饲料中功能性血浆粉
通常用于教槽料,断奶后至少2周
研究记录表现:
30+ years of use 超过30年使用
平均日增重提高31%
平均日采食量提高25%
饵料系数下降4%
3、超出营养范畴的生物活性
提高:肠道功能、肠道屏障完整性、组织修复、免疫反应、运动能力、生长、采食、繁殖性能
降低:炎症、应激、溃疡发病率、腹泻、呼吸道疾病、药物治疗、死亡率
报告主题:《饮水饲料防控,建立非瘟最后防线》
报告人:王金勇博士 百奥明中国高级技术经理
报告内容:
一、场内最大传播隐患在哪里?
病毒总能突破外三层、内三层防线,来到嘴边
总会被吃下去、喝下去,感染猪只,群内传播
阻断途径:
消毒剂—6层防线+舍内,高压拦截,百密一疏
饲料—高温,其他措施,仍有漏洞
饮水—最快散播,尚无方法
神药—掩护敌人暴露机会,散毒加长,早快严小
中小场:消毒有差距,场内堵截更需要
水里、饲料里怎么实现非瘟阻断?
二、机理与证据
酸解离低PH效应+透化剂破囊膜+酸分子效应
非瘟病毒耐受PH为4-10
饮水,吃料后喝水,低PH 对非瘟病毒有初步抑制作用
透化剂:破膜利器
ASFV 稳定PH值4-10,有囊膜,有抵抗力
饲料、饮水未被消毒所涵盖。进嘴是最后屏障
PH效应+破囊膜+有机酸分子效应,将会大大促进其他的抑杀ASFV作用,成为一条有效的阻断途径。
三、产品研发与应用
场内堵截:消毒,隔离……
场内强化:
水线—百优酸液体--特点是快速杀灭
饲料—百优酸固体,湿拌料--慢速持久
结合霉菌毒素防控,百霉清-百霉克
目的:堵住黏膜与免疫损伤疏漏,减少病毒侵染机会
下半场主持人:滚双宝教授,甘肃生猪产业技术体系创新团队首席专家,甘肃农业大学动物科技学院院长、教授
报告主题:《非洲猪瘟常态下猪场生物安全系体建设实务》
报告人:余旭平教授,浙江大学动物预防医学研究所副所长
报告内容:
非洲猪瘟疫情特点:
1、疫情长距离跨越性传播
2、报告疫情中 屠宰厂很少
3、开始在散户和小猪场,随后引爆大型猪场
4、疫情呈点状发生
传染病流行的三个基本环节
传染源:活猪、死猪、猪肉
传播途径:水、饲料、血浆蛋白粉、人、车、空气……
易感动物:易感猪、野猪
牧场生物安全怎么做?
生物安全=消毒??
相对隔离+消毒
隔断——关键控制点
通过消毒/稀释,到达:污染低于安全剂量
非洲猪瘟的特点:(与FMD、PRRS的比较)
1、传播速度慢
2、病毒耐受力:
3、强抵抗力:
对PH抵抗力强
环境中存活时间长
对温度相对敏感,对有机溶剂敏感
有效的消毒药物:2%NaOH 3%NaCLO 石灰乳、过硫酸盐
消毒药物+浓度+消毒时间 浸润
牧场生物安全
如何画红线?净区(白色区)、缓冲区(灰色区)、脏区(黑色区)
比喻为:孙悟空拿金箍棒在地上划线
白骨精进步了红线圈内,唐僧可以出红圈,但也不能回到圈内
非洲猪瘟防控风险点:
牧场防控、重点、风险点
1、人员出入
2、月台和装猪车
3、尸体/粪肥转运
4、饲料与运输车辆
5、兽药疫苗、小件用具、快递
6、食堂采购&就餐
7、水源
人员通道什么管用?
1、洗澡
真洗澡?还是摆样子?
每天洗澡两次以上原则上一定有问题!!!
2、风淋
3、换鞋、更衣、洗手、消毒
换鞋后经过消毒池,用洗手+聚维酮碘消毒,解决污染的手
4、穿防护服?鞋套??
如何达到更高生物安全要求?
人员按可能的污染程度分级管理
跨界移动到更高一级:洗澡/风淋/消毒通道
隔离区过度生物3-10天??
多级“稀释”任何可能的污染
装猪台外移可行吗?把猪运到荒郊野外去接驳转车?管用吗?
防不胜防的病原微生物传播:飞沫传播、尘埃传播
装猪台的改造、饲料厂的改造、洗消中心及严格控制洗消质量(烘烤是核心)……
如何达到更高生物安全要求?
1、多级“稀释”可能的污染
2、更严格的隔断
3、洗消中心=洗+消+烘=更严格的隔断+“稀释”
小结:
非洲猪瘟的特点:
1、需要大感染剂量、传播能力弱、传播慢
2、病毒耐受力强、不易彻底灭活
生物安全的核心思维
1、通过隔断、消毒,有效减少污染量
2、通过多级稀释,使污染降低至低于感染剂量
3、成败在于细节!时刻关注、堵住漏洞!
报告主题:《口腔鼻腔黏膜屏障与预防口鼻传播非瘟》
报告人:梁梓森教授 华南农业大学
报告内容:
一、非洲猪瘟从口鼻传播
巨噬细胞
起源:单核细胞——巨噬细胞(组织细胞)
功能:吞噬、抗原呈递、分泌
ASFV在巨噬细胞的繁殖与输出
ASFV在猪体内扩散:
巨噬细胞——ASFV——体液(组织液、淋巴和血液)——全身(特别在免疫器官和淋巴组织)——在巨噬细胞等再复制、繁殖——再循环、扩散。
二、猪口腔和鼻腔黏膜的结构与屏障
猪口腔黏膜的组织结构:黏膜上皮、固有层、
猪口腔黏膜的屏障:
(1)机械屏障、
(2)化学屏障(唾液、激素、抑菌物质等)
(3)生物屏障(有益菌群)
(4)免疫屏障
a淋巴组织:黏膜相关淋巴组织、B细胞、T细胞、NK细胞、巨噬细胞等
b生物活性物质
c巨噬细胞
三、预防口鼻传播非洲猪瘟
1、思路:
(1)阻隔病毒入猪场;
(2)在猪口腔、鼻腔把病毒灭活;
(3)筑牢口鼻腔黏膜屏障。
2、方案:
(1)切实做好生物安全各项工作
关键点:杜绝或减少人车物来往;来的人车物务必消毒好;筑牢猪场周围的屏障;认真、严格做好各个细节。
重中之重:人及其责任感!
(2)认真做好饮水消毒
如海威可,次氯酸钠,亚氯酸,过氧乙酸等。
(3)精准选好有效预防ASFV的口服产品
日常(感染非瘟前):如柠檬康(粘饲料,挂黏膜,灭病毒),助力强(牢屏障,强免疫)。加强:维霉素,大败毒,维康灵。
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